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小知识 | 流式手机术检测手机app

作者:小科    发布日期:2021-04-21 09:00


手机appcell cycle 是指从一次手机分裂形成子手机开始到下一次手机分裂形成子手机为止所经历的过程,它反映了手机增殖的速度。在临床上,有很多研究证明,手机app分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。

一个完整的手机app包含间期和分裂期(M期)两个阶段,间期又分为DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2期),处于不同时期的手机的DNA 含量存在差异。一般认为,G 1 期手机具有增殖活性,参与手机app循环,是二倍体手机;S 期手机,DNA 含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入 G 2 期,最终进入 M 期。检测手机app常用的方法是检测DNA含量,可以选择能与DNA结合的荧光染料(如PI等),再根据手机各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的手机比例。
 


 


登录u乐可以提供两种手机app检测下载盒,在组分上,#CCS01是DNA染色液和破膜剂的混合装;#CCS012为DNA染色液和破膜剂的独立包装。在用途上,#CCS01可用于一步法活手机手机app检测,固定手机也可用,但推荐用#CCS012效果更佳;#CCS012可用于活手机和固定手机的手机app检测。
 

 

 

〈 手机app流式手机术  分析步骤 〉


一、可当天检测的活手机样本

1. 收集2 × 105- 1 × 106个手机,离心弃上清。用PBS洗涤一次,离心弃上清。

2. 加入1 ml DNA Staining solution和10 μl Permeabilization solution,涡旋振荡5 - 10秒混匀。室温避光孵育30分钟。

3. 选择最低上样速度,在流式手机仪上进行检测。如需在荧光显微镜下观察,则离心手机,弃上清,加入新鲜缓冲液重悬。滴加1滴手机悬液至载玻片,盖上盖玻片后使用合适的滤光片进行观察。


二、当天无法检测的活手机样本

1. 按照下述方法固定,或其他合适的方法固定

   a. 收集2 × 105- 1 × 106个手机,离心弃上清。轻弹管壁,使沉淀重悬在残余的液体中,加入1 ml 室温下的PBS。

   b. 将手机缓慢加入至3 ml无水乙醇(-20℃预冷)中,边加边高速搅拌。-20℃固定过夜,可保存数月。

2. 检测当天,将固定手机离心,弃去乙醇,轻弹管壁使沉淀松散,加入2 - 5 ml 室温下的PBS,放置15分钟使手机再次水化。离心,弃上清。

3. 加入1 ml DNA staining solution,涡旋振荡5 - 10秒混匀。室温避光孵育30分钟。

4. 选择最低上样速度,在流式手机仪上进行检测。如需在荧光显微镜下观察,则离心手机,弃上清,加入新鲜缓冲液重悬。滴加1滴手机悬液至载玻片,盖上盖玻片后使用合适的滤光片进行观察。

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